注意事项 该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。
背景描述 293T细胞是293 [HEK-293]细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株。
产品名称 | 人胚肾细胞系293T [HEK-293T]规格 | 产品别名 | 293T [HEK-293T](人胚肾细胞) |
种属 | 人 | 英文名称 | 293T |
规格 | 1×10?cells/T25培养瓶 | 货号 | GOY-01X0005 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
品牌 | 谷研 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
别称 Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo
种属 人类
年龄(性别) 胎儿
组织来源 胚胎肾
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生物安全等级 1
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~24-30小时
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
保藏机构 ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635
1、先尽量吸干净T25瓶原培养基,再加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
2、T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层,将培养瓶放入37度培养箱消化;
3、消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消;
4、混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
5、加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里,补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
20号染色体开放阅读框160抗体研究领域 细胞生物 发育生物学 神经生物学 | 肌醇测定培养基100(g)incubationmedia肌醇测定培养基100(g) |
磷酸化受体相关蛋白6抗体研究领域 产品类型磷酸化抗体 | Voges-Proskauer(V-P)试剂5ml*4 |
粘蛋白-5B抗体研究领域 细胞生物 信号转导 细胞骨架 | 大鼠血小板生成素 |
KANK1单克隆抗体研究领域 细胞生物 信号转导 | 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISAKit |
碳水化合物磺基转移酶7抗体研究领域 细胞生物 信号转导 | 人二氢硫辛酸转乙酰酶(DLAT)酶联免疫吸附测定试剂盒 |
补体C4 γ 链蛋白抗体研究领域 抗体来源;Rabbit | 一号植物蛋白胨VegetablePeptoneOxoid500g |
胰羧肽酶E抗体研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学 生长因子和激素 病 | 一号植物蛋白胨VegetablePeptoneOxoid500gincubationmedia |
环指蛋白169抗体研究领域 细胞生物 免疫学 | 异丙醇(色谱级) |
溶质载体转运蛋白家族38成员A5抗体研究领域 细胞生物 信号转导 转运蛋白 | 大鼠紧张素1-7(ANG 1-7)ELISA试剂盒 |
PE标记人CD83单克隆抗体研究领域 抗体来源;Mouse | rabbitIerleukin6,IL-6 |
环指蛋白88抗体研究领域 细胞生物 免疫学 泛素 | CLIAKitforECP(Humaneosinophilcationicprotein) |
B淋巴细胞粘附分子CD22重组兔单克隆抗体研究领域 免疫学 干细胞 细胞粘附分子 细胞表面分子 | DuckIerferonγ,IFN-γ细胞类型标志物 淋巴细胞 b-淋巴细胞 |
PE标记小鼠CD79b单克隆抗体研究领域 抗体来源; | 人脂肪酸结合蛋白4(FABP-4)免疫试剂盒 |
线粒体信号MAVS蛋白抗体研究领域 细胞生物 免疫学 转录调节因子 锌指蛋白 | 人胚肾细胞系293T [HEK-293T]规格Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人维生素D(VD)ELISA试剂盒 |
凋亡相关蛋白5抗体研究领域 细胞生物 发育生物学 细胞凋亡 | HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISA试剂盒 |
鸟嘌呤解离刺激因子样蛋白1抗体研究领域细胞生物 信号转导 G蛋白信号 | humandopamine,DA |
一、细胞密度怎么计算的?
严格意义上,细胞密度需要收集细胞悬液计数细胞数量,但在实际培养过程中,并不需要为了控制细胞数量而消化细胞计数。因此,常用的细胞密度指细胞相对于生长密度的比值,贴壁细胞可以粗略的用细胞所占培养容器底面积百分比表示,即显微镜下观察培养容器底部,有细胞的区域占总区域的百分比值,当然这种表达方式受限于单个细胞生长不同密度时所占面积不同导致并不严谨,但也是相当直观、简便的表现细胞状态的一种方式;
二、培养过程中细胞碎片较多怎么处理?
1. 细胞内的黑色颗粒是细胞外分泌泡及细胞器折光,这个属于细胞自身特性,无法清除也无法改变,大部分细胞都会有这种现象,只是不同细胞颗粒多少有区别,细胞培养体系不适应、营养缺乏、渗透压异常等均可能导致细胞内颗粒增加,建议使用合适的培养条件。
2. 细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片和产物,可以先吸走培养基后用PBS润洗清除,再加新的培养基继续培养。润洗不能清除的可以换液清洗后等细胞密度70-80%左右消化处理细胞,消化完成后加完全培养基终止消化,混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
三、细胞具体消化时间是多久?
每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样的,不能完全规定消化时间,以实际消化效果和客户经验为准。
四、细胞培养瓶是怎么包被的?
细胞培养瓶包被方法有很多,例如多聚赖氨酸、明胶、鼠尾胶原等,不同的包被原理和效果都不太一样,具体可以根据实际实验室条件选择合适的包被材料。注意包被后应及时使用,包被后放的时间越长效果越来越差的。
五、细胞培养过程中出现聚团现象怎么处理?
细胞传代过程中建议尽可能吹散细胞,并在显微镜下确认细胞基本分散后再接种细胞;
细胞培养建议使用培养体系并保证温度、湿度、二氧化碳浓度适宜,能有效避免细胞吹散后在贴壁时再聚团的现象, 也可以减轻细胞聚团后无法重新摊开生长的;
培养过程中轻微聚团可以稍微延长消化时间并在消化终止后将细胞悬液静置1-2min,让大团细胞下沉后尽量吸取上层的分散细胞传代,聚团过于严重的建议重新培养或者更换培养体系;