测定原理：

试剂组成和配制：

样品酶液的制备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离 清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃ 上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。  
测定操作：
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 660nm,蒸馏水调零。 2、酶促反应(在 EP 管中加入下列试剂) 注意事项: 1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒 100 管只能测 48 份 Ca++ Mg++-ATP 酶。 2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。避免磷污染是检测成败的关键。 3、空白管和标准管只要做一管。 
计算公式：
1、血清(浆)Ca++ Mg++- ATPase 活力的计算: 定义:每小时每毫升血清(浆)中 Ca++ Mg++- ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。 Ca++ Mg++-ATP 酶活力(μmol/h/mL)= [C 标准管×V 总]×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷V样÷T=7.5×(A 测定管-A 管-A 空白管) 2、组织、细菌或细胞中 Ca++ Mg++- ATPase 活力的计算: (1)按蛋白浓度计算: 定义:每小时每毫克组织蛋白中 Ca++ Mg++- ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。 Ca++ Mg++-ATP 酶活力(μmol/h / mg prot)= [C 标准管×V 总]×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V 样×Cpr)÷T =7.5 照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr (2)按样本鲜重计算: 定义:每小时每克组织中 Ca++ Mg++-ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。 Ca++ Mg++-ATP 酶活力(μmol/h /g 鲜重)=[C 标准管×V 总]×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W× V 样÷V 总)÷T=7 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W (3)按细菌或细胞密度计算: 定义:每小时每 1 万个细菌或细胞中 Ca++ Mg++-ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个酶活力单位。 Ca++ Mg++-ATP 酶活力(μmol/h /104 cell)= [C 标准管×V 总]×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(500×V 样÷V 样总 定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)C 标准管:标准管浓度,0.5μmol/mL;V 总:酶促反应总体积,0.25mL;V 样:加入样 
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