公司动态
 
首页 > 公司动态  >  大麦源性成分PCR检测试剂盒 PC...

大麦源性成分PCR检测试剂盒 PCR-荧光探针法反应五要素

2022-08-15

大麦源性成分PCR检测试剂盒 PCR-荧光探针法反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体 ART4
AKIRIN2蛋白抗体 AKIRIN2
ADP核糖基化样因子8B抗体 ARL8B
三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体 ATAD2
AKIRIN1蛋白抗体 AKIRIN1
锚定蛋白样蛋白1抗体 ASZ1
腺苷酸激酶2抗体 Adenylate kinase 2
精子顶体前体蛋白抗体 Acrosin
黑色素瘤缺失样蛋白1抗体 AIM1L
未知糖基化转移酶AER61抗体 AER61
铁蛋白Fe65抗体 FE65
抑癌基因ras同源家族1抗体 ARHI
转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体 AP2 alpha
心钠素抗体 ANP
丙氨酰tRNA合成酶2抗体 AARS2
丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体 AKAP12
核突触蛋白α抗体 Alpha-Synuclein
自噬相关蛋白4B抗体 APG4B
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 ADAMTS12
α-辅肌动蛋白4(内参)抗体 alpha Actinin 4-Loading Control
碱性磷酸酶抗体 Alkaline Phosphatase
AU1 tag标签抗体 AU1 tag
脂肪细胞增强结合蛋白1 AEBP1
蛋白激酶B AKT1