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pRB视网膜母细胞瘤抑制蛋白ELISA试剂盒操作步骤

2022-08-10

 pRB视网膜母细胞瘤抑制蛋白ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体
磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体
锚蛋白重复结构域蛋白32抗体
共济失调7样蛋白3B抗体
感染性蛋白唯一蛋白1抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体
植物生长激素ABP1抗体
磷酸化活化复制因子2抗体
alpha 1肾上腺素能受体B抗体
Bcl2 alpha蛋白抗体
白细胞抗原B相关转录蛋白5抗体
BTB/POZ结构域蛋白1(丙型肝炎病毒的NS5A反转录蛋白8)抗体
BCL7B蛋白抗体
碱性核蛋白2(锌指蛋白basonuclin2)抗体
B细胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗体
先天性脂肪代谢障碍蛋白2抗体(常染色体显性遗传痉挛性截瘫17)
B细胞迁移基因1抗体
脊髓小脑共济失调蛋白BEAN1抗体
B7H6蛋白抗体
B细胞特异性转录因子抗体
桥连整合因子蛋白抗体
BADH2抗体(水稻)
丁酰胆碱酯酶单克隆抗体
磷酸化β 连环素蛋白抗体